La carpaïne est l'alcaloïde majoritaire des feuilles de Carica papaya. Ses propriétés pharmacologiques ont été étudiées, mais aucun effet majeur n'a pu être franchement révélé. Une activité cytotoxique in vitro a toutefois été décrite [L. Oliveros-Belardo, Asian J. Pharm., 2, 26, (1972)], mais ce résultat n'a pas été exploité.

Dans le cadre de nos recherches de nouveaux anticancéreux d'origine naturelle, nous avons donc préparé une série de dérivés de la carpaïne, que nous avons évalués sur des tests pharmacologiques (brevets FR 2702768 et FR 2704858). Ces nouveaux composés, en particulier les mono-amides représentés ci-dessous, montrent une cytotoxicité nettement supérieure à celle de la carpaïne [Proceedings of the 86th Annual Meeting, American Association for Cancer Research, Toronto, Abstr. 2315, (1995)].

Carpaïne (brev€tFR2702768)

Par contre, nous n'avons pas observé de bonne corrélation entre les activités cytotoxiques in vitro et l'activité antitumorale chez l'animal. Nous avons alors supposé que les deux fonctions lactones du squelette de la caφaïne peuvent être hydrolysées in vivo. Cela conduirait à des produits de type ' monomères" qui seraient inactifs, ce que nous avons démontré : les dérivés schématisés ci-dessous n'exercent pas de cytotoxicité significative.

Dérivés "monomères"

• Afin d'éviter ce phénomène, nous avons synthétisé une nouvelle famille de dérivés de type "éther" en réduisant sélectivement les fonctions lactones. Les dérivés obtenus possèdent la structure générale I, et ont l'avantage de résister à ces éventuelles réactions d'hydrolyse.

La présente invention, réalisée au Centre de Recherche Pierre Fabre, a donc pour objet de nouveaux composés de formule générale i, leur préparation par hémisynthèse à partir de la caφaïne et leur application en thérapeutique.

W

où R _j et R2 représentent : • soit tous deux un atome d'hydrogène (R j = R2 = H),

• soit Rj un atome d'hydrogène, et R2 un groupement A-Arylc, pour lequel - Aryle représente un noyau phényle, naphtyle ou benzothiényle,

substitué ou non par un ou plusieurs groupements halogène, méthyl, méthoxy, trifluoromethyl ou trifluorométhoxy,

- A représente un groupe méthylène (CH2) ou un groupe carbonyle

(OO), • soit tous deux un groupement A-Aryle (Rj = R2 = A-Arylc) comme défini ci- dessus, ainsi que leurs sels therapeutiquement acceptables.

L'invention concerne également les composés intermédiaires de formule 2, que l'on peut isoler lors des réactions de réduction, dans lesquels une seule fonction lactone a été réduite en fonction éther :

où Rj et R2 représentent :

- soit tous deux un atome d'hydrogène (Rj = R2 = H), - soit tous deux un groupement CH2-Arylc, Aryle étant défini ci-dessus ainsi que leurs sels therapeutiquement acceptables.

L'invention concerne plus particulièrement les produits de formule générale i choisis parmi les composés suivants : - 3,16-didéoxy- 12,25-di(3,4,5-triméthoxybenzyl)-3,3, 16, 16-tétrahydrocaφaïne,

- 12,25-dibenzyl-3, 16-didéoxy-3,3, 16, 16-tétrahydrocaφaïne, - 3,16-didéoxy-3,3, 16, 16-tétrahydrocaφaïne,

- 12-benzoyl-3, 16-didéoxy-3,3, 16, 16-tétrahydrocaφaïne,

- 12,25-dibenzoyl-3, 16-didéoxy-3,3, 16, 16-tétrahydrocaφaïne, - 3,16-didéoxy-3,3, 16, 16-tétrahydro- 12-(3-trifluorométhylbenzoy l)carpaïne,

- 12-(4-chlorobenzoyl)-3, 16-didéoxy-3,3, 16,16-tétrahydrocaφaïne,

- 12,25-di(4-chlorobenzoyl)-3, 16-didéoxy-3 ,3,16,16-tétrahydrocarpaïne, - 3,16-didéoxy- 12-(4-méthylbenzoyl)-3 ,3,16,16-tétrahydrocarpaïne,

- 3,16-didéoxy-12,25-di(4-méthylbenzoyl)-3,3,16,16-tétrahyd rocarpaïne, - 3,16-didéoxy- 12-(2-naphtoyl)-3 ,3,16,16-tétrahydrocarpaïne,

- 3,16-didéoxy-12,25-di(2-naphtoyl)-3,3,16,16-tétrahydrocarp aïne,

- 12-(3-chloro-2-benzo[b]thénoyI)-3,16-didéoxy-3,3,16,16-té trahydrocarpaïne,

- 12,25-di(3-chloro-2-benzo[b]thénoyl)-3,16-didéoxy-3,3,16,1 6-tétrahydrocarpaïne, - 3,16-didéoxy- 12,25-di(2-trifluorométhoxybenzoyl)-3 ,3,16,16-tétrahydrocarpaïne, ainsi que leurs sels avec des acides minéraux ou organiques therapeutiquement acceptables, en particulier le chlorhydrate, le tosylate et le maléate, pour les composés comportant une fonction amine libre.

L'invention concerne également plus particulièrement les produits de formule 2 choisis parmi les composés suivants : - 3-déoxy-12,25-dibenzyl-3,3-dihydrocaφaïne,

- 3-déoxy-3,3-dihydrocaφaïne, ainsi que leurs sels avec des acides minéraux ou organiques therapeutiquement acceptables, en particulier le chlorhydrate et le tosylate.

Nous avons remarqué que la réduction des fonctions lactones en fonctions éthers n'est réalisée de façon satisfaisante que si les deux aminés secondaires de la caφaïne sont protégées sous forme d'amide. Ces composés protégés possèdent la structure générale 3, dans laquelle A représente une fonction carbonyle C=O, et Aryle un groupement aromatique comme défini ci-dessus. La préparation de ces dérivés est décrite dans le brevet FR 2704858. On peut les obtenir, par exemple, en faisant réagir la caφaïne avec un chlorure d'acide de type Aryle-CO-Cl, en présence de triéthylamine dans le dichlorométhane.

La réduction de lactone en éther n'est pas une réaction générale, et relativement peu d'exemples sont répertoriés dans la littérature. Seules les conditions décrites par H. C. Brown et coll. [J. Org. Chem., 47, 3153, (1982)] utilisant le

complexé borane - diméthylsulfure nous ont permis d'accéder aux produits désirés avec de bons rendements.

En présence d'un excès de ce réactif, toutes les fonctions carbonyles (Iactone et amide) des composés de formule générale 3 où A = C=O sont réduites. Cette réaction est donc effectuée en milieu anhydre et sous atmosphère inerte par action d'un excès du complexe borane - diméthylsulfure [BH3 : (CH3)2S] dans le tétrahydrofuranne, à une température comprise entre - 20 °C et le reflux du solvant utilisé, de préférence le tétrahydrofuranne. Les produits de formule 3 où A = C=O sont donc transformés en composés de formule i dans lesquels Rj = R2 = A-Aryle (A = CΗ2). Cette étape est schématisée ci-dessous :

Le suivi de l'avancement de la réaction permet de mettre en évidence plusieurs composés intermédiaires, qui ont été isolés et caractérisés. Ceci est réalisé aisément si le milieu réactionnel est neutralisé avant la disparition complète du produit de départ 3 dans lequel A = C=O ou si la réaction est effectuée en présence d'un défaut de réactif de réduction. Chronologiquement, les fonctions amides réagissent les premières, conduisant à des dérivés de formule 3 dans lesquels A représente un groupe méthylène (A = CH2). On isole ensuite les composés de formule 2 dans lesquels Rj et R2 représentent le groupement A-Arylc (A = CH2) précédemment défini. Cette suite de réactions est schématisée ci-dessous :

^{^}

La transformation des composés de formule i où Rj = R2 = A-Arylc (A = CH2) en dérivé où Rj = R2 = H est effectuée en présence d'un catalyseur comme le palladium supporté sur charbon, soit par action de l'hydrogène, à une pression comprise entre la pression atmosphérique et 8 bars, soit par action d'un agent donneur d'hydrogène comme l'hydrazine ou le formate d'ammonium, dans un solvant polaire, de préférence le méthanol ou l'éthanol, et à une température comprise entre la température ambiante et le reflux du solvant. Cette étape est schématisée ci-dessous :

I : R _j =1^ = AArçie (A=CH^ Ir R _j ^≈ R _j ≈H

Dans les même conditions, les dérivés de formule 2 dans lesquels R _j = R2 = A-Aryle (A ≈ CH2) sont transformés en dérivé de formule 2 dans lequel R _j = R2 = H, comme schématisé ci-dessous :

Les composés de formule i dans lesquels Rj représente un atome d'hydrogène (Ri = H) et R2 représente un groupement A-Aryle où A est une fonction carbonyle (A = C=O) sont préparés à partir du composé de formule l dans lequel Ri et R2 représentent un atome d'hydrogène (Ri = R2 ≈ H). Lors de la même réaction, on isole également les composés disubstitués de formule X dans lesquels Ri = R2 = A-Aryle (A = C=O). Cette étape est réalisée par l'action d'un chlorure d'acide de formule générale Aryle-A-CI, pour lequel A = C=O, dans un solvant inerte comme le tétrahydrofuranne ou le dichlorométhane en présence d'une base comme une amine tertiaire, à une température comprise entre 0 °C et le reflux du solvant, suivant le schéma ci-dessous :

6263 PC17FR97/00087

I: R ₁ =R ₂ =H

Aryle-AO

l : R ₁ =H, R ₂ =A-AryIe(A=GO) I: R ₁ =R ₂ =A-AryIe(A=G=0)

Les dérivés de formule générale i mono-substitués (Ri = H, R2 = A-Arylc, A = C=O) et di-substitués (Ri = R2 = A-Aryle, A - C=O) sont ensuite séparés par chromato graphie .

Les exemples suivants illustrent l'invention, sans toutefois en limiter la portée. Les caractéristiques physico-chimiques et spectroscopiques confirment la structure des composés obtenus selon l'invention.

EXEMPLES

Exemple 1 :

Composé la : 3,16-didéoxy-12,25-di(3,4,5-triméthoxybenzyl)-3,3,16, 16- tétrahydro caφaïne

Ri = R2 = 3,4,5-triméthoxybenzyl

Dans un ballon de 10 ml surmonté d'un réfrigérant et placé sous courant d'azote, on solubilise dans 2 ml de THF sec 250 mg (0,28 mmoles) de 12,25- di(3,4,5-triméthoxybenzoyl)caφaïne, préparée suivant la méthode décrite dans le brevet FR 2704858. On ajoute ensuite 1,4 ml (2,8 mmoles) d'une solution 2 M de complexe [BH3:(CH3)2S] dans le THF. Après 5 heures environ de chauffage à reflux, le mélange est versé dans 100 ml d'une solution saturée de chlorure d'ammonium, que l'on extrait par 3 fois 20 ml de dichlorométhane. La phase organique est séparée, séchée sur MgSθ4, filtrée et évaporée. Le résidu huileux obtenu est purifié par chromatographie sur colonne de silice éluée par un mélange Ce H ₁₄ : Et2θ : AcOEt (50 : 47 : 3). La 3, 16-didéoxy-12,25-di(3,4,5- triméthoxybenzyl)-3,3,16,16-tétrahydrocaφaïne la (140 mg; 61 %) est ainsi récupérée sous forme d'huile incolore.

C48 H78 N2 O8 : 81 1,15

Pt de fusion : (huile)

IR (KBr) :

2932 , 2855 , 1591 , 1504 , 1460 , 1419 , 1329 , 1232 , 1128 , 1012 cm-1. RMN lH (200 MHz, CDCI3) :

1,07 (d, J = 6,7 Hz, 6 H); 1,26 - 1,83 (massif, 36 H); 2,52 (m, 2 H); 2,95 (m, 2 H); 3,31 - 3,39 (m, 6 H); 3,74 - 3,84 (m, 4 H); 3,84 (s, 12 H); 3,86 (s, 6 H); 6,61 (s, 4 H). RMN 13c (50,3 MHz, CDCI3) : 14,47 24,13 25,64 25,92 27,37 28,31 28,85 29,34 29,79 32,29 54,50 56,07 56,92 59,05 60,94 67,95 77,61 104,72 136,26 137,47 152,99. Spectre de masse (Impact Electronique) : m/e = 810 ( M+) , 697 , 629 , 449 , 406, 260 , 181 (100 %) , 84.

Exemple 2 :

Composé Lb : 12,25-dibenzyl-3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocaφaïne Ri = R2 = A-Aryle, A = CH2, Aryle = phényl Ce composé est préparé suivant les conditions opératoires décrites à l'Exemple 1, en utilisant comme produit de départ la 12,25-dibenzoylcarpaïne, préparée suivant la méthode décrite dans le brevet FR 2704858, à la place de la 12,25-di(3,4,5-triméthoxybenzoyl)carpaïne. La purification est effectuée par chromatographie sur colonne de silice éluée par un mélange CgH^ : AcOEt : MeOH (4 : 2 : 1). On récupère ainsi la 12,25-dibenzyl-3,16-didéoxy-3,3,16,16- tétrahydrocaφaïne lb avec un rendement de 60 %.

C42 H66 N2 O2 : 630,99

Pt de fusion : (huile) IR (KBr) : 2932 , 2855 , 1452 , 1371 , 1344 , 1 101 , 738 cm-1

RMN IH (200 MHz, CDCI3) :

1 ,32 - 1,62 (massif, 39 H); 2,31 (massif, 4 H); 3,65 (s, 18 H); 4,21 (m, 1 H);

4,69 (m, 1 H); 4,99 (massif, 3 H); 6,54 (s, 4 H).

RMN 13C (50,3 MHz, CDCI3) : 14,85 24,64 24,94 25,94 27,31 28,40 28,83 29,37 29,83 32,56 53,63

56,33 57,30 59,63 68,12 77,53 126,41 128,14 128,35 141 ,60.

Spectre de masse (D/CI dans NH3) : 631 ( MH+)

Exemple 3 : Composé Jjç : 3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocaφaïne Rl = R ₂ = H

On solubilise 800 mg (1,26 mmoles) de composé Lb préparé à l'Exemple 2 dans 30 ml d'éthanol absolu, auxquels on ajoute 90 mg de palladium sur charbon à 10 %. Le mélange est ensuite placé sous atmosphère d'hydrogène. Après 24 heures d'agitation, le milieu réactionnel est filtré sur Célite et le solvant est évaporé. Le résidu huileux obtenu est purifié par chromatographie sur colonne de silice éluée par

un mélange CHCI3 : EtOH (90 : 10) puis (85 : 15).. La 3,16-didéoxy-3,3,16,16- tétrahydrocarpaïne lç ainsi recueillie (480 mg; 84 %) peut être ensuite salifiée sous forme de dichlorhydrate hydraté, de ditosylate ou de dimaléate.

4 Dichlorhydrate : C28 H54 N2 O2.2 HC1 , 1 H ₂ O : 541,67 Analyse élémentaire :

%Calc. C 62,08 H 10,79 N 5,17

%Tr. C 62,27 H 10,57 N 5,18

Pt de fusion : > 260 °C IR(KBr):

3439^2934,2856, 1560, 1458, 1381 , 1340,1095, 1006 cm-1.

* Ditosylate : C28 H54 N2 O2.2(C7Hsθ3S) : 795,14 Analyse élémentaire : %Calc. C 63,44 H 8,87 N 3,52

%Tr. C 63,17 H 8,89 N 3,58

Pt de fusion : > 260 °C

IR (KBr) :

2932 , 2856 , 1599 , 1460 , 1251 , 1219 ,1161 ,1120 , 1029 , 1010 cm-1.

* Dimaléate : C28 H54 N2 O2.2(C4H4Û4) , 1 H ₂ O : 700,89 Analyse élémentaire :

%Calc. C 61,69 H 9,20 N 3,99

%Tr. C 61,60 H 9,14 N 4,06 Pt de fusion: 160 °C IR (KBr) :

3427,3167,2937,2855, 1701 , 1577,1468, 1361 , 1194, 1105, 1087, 1001 cnr 1.

RMN lH (200 MHz, CDCI3) sur la base : l,07(d,J=6,7Hz,6H); 1,22- 1,41 (massif, 36 H); 2,06 (t,J= 3,1 Hz, 1 H); 2,11 (t, J= 3,1 Hz, 1 H); 2,54 (m, 2 H); 2,69 (q,J= 6,34 Hz, 2 H); 3,07 (s large, 2 H); 3,27 (m, 2 H); 3,44 (m, 2 H).

RMN 13C (50,3 MHz, CDCI3) sur la base :

18,67 25,52 26,98 27,25 - 29,31 29,49 29,92 30,07 37, 16 54,96 55,97 67,94 74,16

Spectre de masse (F.A.B.) : 451 ( MH+)

Exemple 4 :

Composé lç : 3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne

Rl = R ₂ = H

On dissout 8,2 g (13 mmoles) du composé lb, préparé suivant l'Exemple 2, dans iθO ml d'éthanol absolu contenant 1 g de palladium sur charbon (5 %). On y ajoute 6,5 ml (130 mmoles) d'hydrate d'hydrazine, et on porte le tout à reflux pendant trois heures. Le mélange est alors filtré sur Célite, concentré sous vide et extrait au dichlorométhane. La phase organique est séchée sur MgSθ4 et évaporée. Le résidu est purifié sur colonne de silice dans les conditions décrites à l'Exemple 3. La 3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocaφaïne iç recueillie possède les mêmes caractéristiques que décrites à l'Exemple 3, et est ensuite salifiée sous forme de dichlorhydrate (6,3 g; 94 %).

Exemple 5 :

Composé If : 3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydro-12-(3-trifluorométhylbe nzoyl)car- païne

Ri = H, R2 = A-Aryle, A = C=O, Aryle = 3-trifiuorométhylphényl

Dans un ballon de 50 ml, on introduit 700 mg (1 ,55 mmoles) de composé Jk

(sous forme de base libre) dissous dans 15 ml de dichlorométhane. On place le ballon sous agitation, dans un bain de glace et sous atmosphère d'azote, et on y ajoute 0,22 ml (1,58 mmoles) de triéthylamine, puis on verse goutte-à-goutte une solution de 0,23 ml (1,52 mmoles) de chlorure d'acide 3-trifluorométhylbenzoïque dans 3 ml de dichlorométhane.

Après une heure d'agitation, on lave le milieu réactionnel par 2 fois 15 ml d'acide tartrique à 3 % dans l'eau. La phase organique est séparée, séchée sur

MgSθ4, filtrée et évaporée. Le résidu huileux obtenu est purifié par cliromatographie sur colonne de silice éluée par un mélange Et2θ : AcOEt : MeOH (4 : 2 : 0,5). On recueille ainsi 190 mg (19 %) de 3,16-didéoxy-3,3, 16,16- tétrahydro-12-(3-trifluorométhylbenzoyl)caφaïne ï_f, que l'on salifie par addition d'un équivalent d'acide para-toluènesulfonique.

C36 H57 N2 O3 F ₃ . C7H8O3S : 795,04

Analyse élémentaire :

% Cale. C 64,96 H 8,24 N 3,52 % Tr. C 64,14 H 8,18 N 3,55

Pt de fusion : 182 °C

IR (KBr) : 2936 , 2858 , 1631 , 1419 , 1358 , 1323 , 1234 , 1 163 , 1 122 , 1032 ,

1008 cm-1

RMN lH (200 MHz, CDCI3) sur la base : 1 ,22 - 1 ,69 (massif, 45 H); 3,01 - 3,49 (massif, 8 H); 7,54 - 7,66 (massif, 4 H).

Exemple 6 :

Composé !k : 3,16-didéoxy-12-(2-naphtoyl)-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne Ri = H, R ₂ ≈ A-Aryle, A = C=O, Aryle = 2-naphtyl Dans un ballon de 50 ml, on introduit 700 mg (1,55 mmoles) de composé lç

(sous forme de base libre) dissous dans 15 ml de dichlorométhane. On place le ballon sous agitation et sous atmosphère d'azote, et on y ajoute 0,25 ml (1 ,86 mmoles) de triéthylamine, puis goutte-à-goutte une solution de 237 mg (1,24 mmoles) de chlorure d'acide 2-naphtoïque dans 3 ml de dichlorométhane. Après trois heures d'agitation à température ambiante, on lave le milieu réactionnel par 2 fois 15 ml d'acide tartrique à 3 % dans l'eau. La phase organique est séparée, séchée sur MgSθ4, filtrée et évaporée. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur colonne de silice éluée par un mélange Et2θ : AcOEt : MeOH (3 : 2 : 1). On recueille ainsi 240 mg (25 %) de 3,l6-didéoxy-12-(2-naphtoyl)- 3,3,16,16-tétrahydrocaφaïne 1k, que l'on salifie sous forme de chlorhydrate par addition d'une solution d'HCl dans l'éthanol. Après précipitation par de l'éther

ethylique et filtration, le produit est obtenu sous forme de poudre blanche hygroscopique.

C39 H6O N2 O3 . HC1 , 1 ,5 H ₂ O : 668,40 Analyse élémentaire :

% Calc. C 70,08 H 9,65 N 4,19

% Tr. C 70,21 H 9,31 N 4,30

Pt de fusion : 181 °C

IR (KBr) : 3429 , 2934 , 2856 , 1624 , 1570 , 1473 , 1415 , 1352 , 1340 , 1309 , 1097 , 1016 cm-1

RMN lH (200 MHz, CDCI3) sur la base :

1 ,19 - 1 ,78 (massif, 42 H); 2,02 - 2,25 (massif, 3 H); 3, 12 - 3,50 (massif, 8 H); 7,46 -

7,55 (massif, 3 H); 7,83 - 7,86 (massif, 4 H).

Exemple 7 :

Composé lrn : 12-(3-chloro-2-benzo[b]thénoyl)-3,16-didéoxy-3,3,I6,16-té trahydro- carpaïne

Ri = H, R2 = A-Aryle, A = C=O, Aryle = 3-chloro-2-benzo[b]thiényl

Dans un ballon de 50 ml, on introduit 700 mg (1 ,55 mmoles) de composé lç

(sous forme de base libre) dissous dans 15 ml de dichlorométhane. On place le ballon sous agitation et sous atmosphère d'azote, et on y ajoute 0,30 ml (2,15 mmoles) de triéthylamine, puis goutte-à-goutte une solution de 300 mg (1,29 mmoles) de chlorure d'acide 3-chloro-2-benzo[b]thiophène carboxylique dans 3 ml de tétrahydrofuranne.

Après deux heures d'agitation à température ambiante, on lave le milieu réactionnel par 2 fois 15 ml d'acide tartrique à 5 % dans l'eau. La phase organique est séparée, séchée sur MgS04, filtrée et évaporée. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur colonne de silice éluée par un mélange CgH^ : AcOEt : MeOH (3 : 2 : 1 ). On recueille ainsi 165 mg (16 %) de 12-(3-chloro-2- benzo[b]thénoyl)-3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocaφaï ne lm, que l'on salifie

sous forme de tosylate par addition d'une quantité stoechiométrique d'acide para- toluènesulfonique.

C35 H57 Cl N2 O3 S . C ₇ Hg O ₃ S : 817,58 Analyse élémentaire :

% Calc. C 64,63 H 8,01 N 3,42

% Tr. C 64,47 H 8,02 N 3,52

Pt de fusion : 194 °C

IR (KBr) : 3433 , 2930 , 2855 , 1647 , 1458 , 1414 , 1340 , 1226 , 1 172 , 1 124 , 1033 , 1016 cm-1

RMN lH (200 MHz, CDCI3) sur la base :

1 ,17 - 1,74 (massif, 45 H); 2,86 - 3,07 (massif, 2 H); 3,41 (massif, 6 H); 7,41 - 7,49

(m, 2 H); 7,78 (m, 2 H).

Exemple 8 :

Composé In : 12,25-di(3-chloro-2-benzo[b]thénoyl)-3,16-didéoxy-3,3, 16,16- tétrahydrocaφaïne Ri = R2 = A-Aryle, A = C=O, Aryle = 3-chloro-2-benzo[b]thiényl

Lors de la séparation par chromatographie sur colonne du mélange réactionnel obtenu à l'Exemple 7, on récupère aux premières fractions le dérivé disubstitué 12,25-di(3-chloro-2-benzo[b]thénoyl)-3, 16-didéoxy-3,3, 16, 16- tétrahydrocaφaïne Ln sous forme de solide vitreux.

C46 H60 N2 O4 Cl ₂ S ₂ : 840,02 Analyse élémentaire :

% Calc. C 65,77 H 7,20 N 3,33C1 8,44

% Tr. C 65,47 H 7,02 N 3,52CI 8,51

Pt de fusion : 106 °C IR (KBr) : 3429 , 2930 , 2854 , 1635, 1521 , 1416, 1347, 1306, 1252, 1 1 10 cm-1

RMN Ifl (200 MHz, CDCI3) sur la base :

1,16 - 1,37 (massif, 41 H); 1 ,-76 (massif, 4 H); 3,48 (massif, 3 H); 3,79 (m, I H); 4,18 (m, IH); 4,74 (m, IH); 5,16 (m, IH); 7,45 - 7,52 (m, 4 H); 7,81 (m, 4 H).

Exemple 9 :

Composé 2a : 3-déoxy-12,25-dibenzyl-3,3-dihydrocarpaïne 1*1 ~ 1*2 ⁼ A-Aryle, A = CH2, Aryle = phényl

Dans un ballon de 250 ml surmonté d'un réfrigérant et placé sous courant d'azote, on solubilise dans 60 ml de THF sec 26 g (38 mmoles) de 12,25- dibenzoylcaφaïne, préparée suivant la méthode décrite dans le brevet FR 2704858. On ajoute ensuite 100 ml (1 mole) d'une solution 10 M de complexe [BH3:(CH3)2S] dans le THF. Après 5 heures d'agitation à température ambiante, le mélange est versé petit à petit dans 700 ml de méthanol refroidi à 0 °C. Le mélange est ensuite concentré sous vide, et dilué par 300 ml de solution saturée de NH4CI. Après extraction par 2 fois 150 ml de dichlorométhane, la phase organique est séparée, séchée sur MgSθ4, filtrée et évaporée. Le résidu huileux obtenu est purifié par chromatographie sur colonne de silice éluée par un mélange Hexane : AcOEt : MeOH (4 : 2 : 1). On récupère d'abord la 3,16-didéoxy-12,25-dibenzyl-3,3,16,16- tétrahydrocaφaïne la, puis la 3-déoxy-12,25-dibenzyl-3,3-dihydrocarpaïne 2a, que l'on obtient pure après un second passage sur colonne de silice éluée par un mélange CHCI3 : EtOH (99 : 1). Rendement : 35 %. Ce composé peut être isolé sous forme de dichlorhydrate hygroscopique par addition de 2 équivalents d'HCl en solution dans l'éthanol absolu. C42 H64 N2 O3 . 2 HC1 , 2,5 H ₂ O : 762,94

Analyse élémentaire :

% Calc. C 66,12 H 9,37 N 3,67

% Tr. C 65,98 H 9,15 N 3,61

Pt de fusion : (colle)

RMN 1 H (base libre, 200 MHz, CDCI3) :

1,07 (d, J ≈ 6,3 Hz, 3 H); 1,13 (d, J = 6,3 Hz, 3 H); 1,27 - 1 ,69 (massif, 35 H); 1 ,84 (massif, 2 H); 2,35 (m, 2 H); 2,53 (m, 2 H); 2,88 (m, 1 H); 3,30 (m, 1 H); 3,39 (massif, 2 H); 3,73 - 3,95 (m, 2 H); 4,88 (m, 1 H); 7,17 - 7,39 (massif, 10 H).

Exemple 10 :

Composé 2b : 3-déoxy-3,3-dihydrocarpaïne

Ri = R ₂ = H

On dissout 760 mg (1 ,18 mmoles) du composé 2a, préparé suivant l'Exemple 8, dans 20 ml de méthanol absolu contenant 250 mg de palladium sur charbon (5 %) et 300 mg (4,76 mmoles) de formate d'ammonium. On laisse sous agitation 16 heures à température ambiante. Le mélange est alors filtré sur Célite, concentré sous vide et partagé entre 50 ml de Na2CÛ3 à 10 % et 100 ml de dichlorométhane. La phase organique est séchée sur MgSθ4 et évaporée. On recueille 530 mg (96 %) de 3-déoxy-3,3-dihydrocaφaïne 2b sous forme d'huile, que l'on peut isoler sous forme de ditosylate hydraté.

C ₂ 8 H52 N ₂ O3 . 2(C ₇ H ₈ O ₃ S) , 1 H ₂ O : 827,16 Analyse élémentaire :

% Calc. C 60,98 H 8,52 N 3,38

% Tr. C 61,13 H 8,36 N 3,51

Pt de fusion : > 260 °C IR (KBr) : 3017 , 2934 , 2858 , 1734 , 1597 , 1460 , 1338 , 1250 , 1217 , 1 155 , 1 120 , 1030 , 1010 cm-1

RMN lH (base libre, 200 MHz, CDCI3) :

1,02 (d, J ≈ 6,4 Hz, 3 H); 1 ,07 (d, J = 6,4 Hz, 3 H); 1,29 - 1 ,66 (massif, 34 H); 1 ,95 - 2,10 (massif, 2H); 2,30 (m, 2H); 2,54 (m, 2 H); 2,70 (m, 1 H); 2,84 (m, I H); 3,07 (m, IH); 3,28 (m, IH); 3,43 (m, IH); 4,73 (m, IH).

Le tableau I résume les principaux produits synthétisés qui illustrent l'invention, sans toutefois en limiter la portée.

Produit" Point de n° ^R l ^R 2 A Aryle Sel fusion (°C)

In A-Aryle A-Aryle CH ₂ - (huile)

OMe lb A-Aryle A-Aryle CH ₂ - (huile)

le H H - - dimaléate(b) 160 v ld H A-Arylc c=o X) chlorhydrate(b) 130

1c A-Arylc A-Aryle C=0 X) - 70

lf H A-Arylc C=O TT tosylate 182

ig H A-Arylc C=0 Xλ ₀ tosylate(a) 198

lh A-Aryle A-Aryle c=o xx - 76

li H A-Aryle C=0 XX. tosylate 185

ij A-Arylc A-Aryle c=o xx. - 70

1k H A-Arylc C=O XX) chlorhydrate(c) 181

11 A-Arylc A-Arylc C=0 - 82

lm H A-Arylc c=o tosylate 194

Cl

In A-Arylc A-Aryle c=o - 106

lo A-Arylc A-Arylc C=0 i) - 68

2a A-Arylc A-Arylc CH ₂ X) dichlorhydrate(d) (colle)

2b H H - - ditosylate(b) >260

(a):0,5H ₂ O (b) : 1 H ₂ 0 (c) : 1,5 H ₂ 0 (d):2,5 H ₂ 0

Les composés de formule générale 1 et de formule générale 2, préparés suivant l'invention, ont été soumis à des essais pharmacologiques au Centre de Recherche Pierre Fabre (Castres, France). En particulier, les propriétés cytotoxiques de ces composés ont été évaluées sur un test in vitro qui consiste à mesurer l'inhibition de croissance de cellules de leucémie murine L1210 en présence de ces dérivés. Les résultats sont exprimés par une IC50, qui correspond à la concentration en produit testé qui mhibe à 50 % la croissance de ces cellules.

A titre d'exemple, le tableau II regroupe les valeurs d'IC50 pour certains dérivés de l'invention :

Tableau II

Aussi, compte-tenu de ces propriétés pharmacologiques, les composés de l'invention peuvent être utilisés en thérapeutique humaine, en particulier dans le traitement de la pathologie cancéreuse.